作者：罗开云，齐清，王慜，王淑君等，解放军东部战区总医院输血医学科，解放军东部战区总医院烧伤整形科，东南大学医学院

 

斑秃（ａｌｏｐｅｃｉａａｒｅａｔａ，ＡＡ）是一种以圆形或者类圆形为界限的局限性斑片状脱发，不会伴有明显痛感或严重损伤。随着病情加重，可累及全身毛发，对患者形象造成的不良影响容易引起心理不适［１］。目前针对斑秃的治疗方法主要有糖皮质激素、米诺地尔、免疫抑制剂等，但疗效不确定［２］。富血小板血浆（ｐｌａｔｅｌｅｔｒｉｃｈｐｌａｓｍａ，ＰＲＰ）能够促进毛囊干细胞增殖、分化并改善毛囊周围环境，从而达到促进毛发生长的作用，近年来被应用于脱发领域［３］。笔者通过本院利用血袋法制备自体ＰＲＰ局部皮损内注射１次，成功治疗１例经５％米诺地尔治疗４个月不愈的斑秃患者，为临床医务工作者处理此类情况提供经验交流。

 

１对象与方法

 

1.1研究对象患者，男，３４岁，其右颞部与枕部交界处有一处直径２．５ｃｍ类圆形脱发。患者于半年前因工作压力大，出现头发脱落，于我院就诊，予以５％米诺地尔局部涂敷４个月，无明显好转，后自行停药２个月。为进一步治疗再次来我院就诊，告知患者ＰＲＰ治疗并签署知情同意后，予以采集３００ｍＬ全血，血袋法制备ＰＲＰ后剩余血液予以回输。

 

1.2仪器与试剂Ｃｒｙｏｆｕｇｅ６０００ｉ大容量低温离心机（德国Ｋｅｎ－ｄｒｏ），Ｃｅｎｔｉｆｕｇｅ５４１５Ｒ低温离心机（德国Ｅｐｐｅｎ－ｄｏｒｆ），ＳＥ２５０热合机（韩国森通），ＳＴＷ６８１０无菌接驳机（武汉佰美斯），ＸＥ２１００全自动血细胞分析仪（日本Ｓｙｓｍｅｘ），一次性使用滤除白细胞型血袋（广州费森尤斯卡比８５ＰＡ０６ＦＥ００），ＴＧＦ－β１ＥＬＩＳＡ试剂盒（杭州联科，Ａ９８１１０１２１）、ＰＤＧＦ－ＢＢＥＬＩＳＡ试剂盒（杭州联科，Ａ９１３７００８２３）、ＶＥＧＦＥＬＩＳＡ试剂盒（杭州联科，Ａ１８３３１０１３５），１０％葡萄糖酸钙注射液。所有仪器设备均按要求进行维护保养，试剂均为经检验合格且在有效期内使用，并确保能够正常工作。

 

1.3ＰＲＰ制备及检测

 

1.3.1ＰＲＰ制备采集３００ｍＬ全血利用梯度密度３次离心法，第１次离心为１２００×ｇ，１０ｍｉｎ，第２次离心为２１３×ｇ，１０ｍｉｎ，第３次离心为４６５０×ｇ，６ｍｉｎ［４］。

 

1.3.2 ＰＲＰ生长因子检测１．５ｍＬＰＲＰ加入１０％葡萄糖酸钙注射液３００μＬ，充分混匀后３７℃水浴，待形成凝胶后予以１００００×ｇ，１０ｍｉｎ离心，析出上清。检测上清中ＴＧＦ－β１、ＶＥＧＦ、ＰＤＧＦ－ＢＢ含量，严格按照操作说明书进行。

 

1.4治疗方法取１袋－８０℃冻存ＰＲＰ经３７℃水浴１５ｍｉｎ完全融化后，在超净台内用无菌注射器按照１︰５加入１０％葡萄糖酸钙注射液。再次３７℃水浴１５ｍｉｎ形成凝胶后，置于Ｃｒｙｏｆｕｇｅ６０００ｉ大容量低温离心机中离心３８００ｒ／ｍｉｎ，１０ｍｉｎ，析出上清。局部脱发皮肤予以皮下点状注射，每点０．０５ｍＬ，点间距离０．５ｃｍ，计划每月１次，３个月为１个疗程。

 

1.5 疗效判定治愈：斑秃区全部有终毛生长，覆盖达到美容要求，拔毛试验阴性；显效：斑秃普遍有毳毛生长，毛发停止脱落，终毛覆盖率≥５０％，拔毛试验阴性；好转：斑秃区普遍有毳毛生长，毛发停止脱落，终毛覆盖率＜５０％，拔毛试验阴性或阳性；无效：治疗观察３个月，仅有少许毳毛生长，头发继续脱落，拔毛试验阳性。

 

２结果

 

2.1ＰＲＰ制备共制备ＰＲＰ３２．０ｍＬ，无菌接驳后分装５袋，每袋４．０ｍＬ，－８０℃冻存。其余ＰＲＰ０．５ｍＬ用于检测血小板计数，１０．０ｍＬ用于细菌培养，１．５ｍＬ用于生长因子浓度检测。

 

2.2ＰＲＰ血小板计数及细菌培养检测血小板计数９１４×１０９／Ｌ，革兰阳性及革兰阴性细菌培养结果均为阴性。

 

2.３ＰＲＰ生长因子浓度ＴＧＦ－β１１７８２．１６ｐｇ／ｍＬ、ＶＥＧＦ２１２．４０ｐｇ／ｍＬ、ＰＤＧＦ－ＢＢ１１５５０．３３ｐｇ／ｍＬ。

 

2.4治疗周期及疗效判定原计划每月进行脱发部位皮下注射１次，但因新冠疫情等多重因素影响，仅进行１次注射后未再能就诊。３个月后随访，脱发部位已经完全有终毛覆盖，拔毛试验阴性，提示治愈，见图１、图２。

 

 

３讨论

 

ＡＡ患病率约为０．１％～０．２％［５］，约占皮肤科门诊初诊患者的１．０％［６］。发病群体以青壮年多见，其发病机制尚不明确，主要与以下因素相关：①免疫因素：研究表明自身免疫性疾病对于ＡＡ的发病有主要作用，ＡＡ与甲状腺自身免疫具有相关性［７］。银屑病、白癜风、糖尿病等疾病患ＡＡ的风险也比较高。②遗传因素：ＡＡ患者中约８．４％～２５．０％有阳性家族史，其一级亲属患ＡＡ的概率比正常人高。③精神因素：精神因素也与ＡＡ的发病有密切关系，国外学者认为７４％的ＡＡ患者至少有１项以上的精神因素［８］。目前针对ＡＡ治疗的方法疗效不确定，其中应用较多的糖皮质激素具有使皮肤萎缩、毛细血管扩张和体重增加等不良反应［３］。ＰＲＰ因含多种生长因子，如ＥＧＦ、ＴＧＦ－β、ＰＤＧＦ、ＩＧＦ、ＶＥＧＦ等［９］。其中，ＥＧＦ通过激活Ｗｎｔ／β－连环蛋白信号通路促进毛囊外根鞘细胞的增殖，ＰＤＧＦ通过改善毛乳头细胞功能诱导毛发生长，ＴＧＦ和ＩＧＦ促进毛囊干细胞的增殖、分化，ＶＥＧＦ通过促进毛囊周围血管的生成增加毛囊的血供和营养［１０］。目前应用ＰＲＰ治疗ＡＡ包括个案报道、系列研究［１１－１２］、随机对照试验［５，１３－１７］、非随机临床试验［１８］等。本研究阐述了ＰＲＰ治疗ＡＡ的方式和方法，以及ＰＲＰ与５％米诺地尔、曲地奈德等治疗方案的比较，认为在ＡＡ的治疗中ＰＲＰ是一种相对有效和安全的干预措施，其不良反应最小，可能出现的不良反应包括治疗过程中暂时可耐受的疼痛、轻度头痛、轻微瘙痒、短暂红斑水肿和脱皮［１３－１７，１９－２２］。

 

本文报道了１例ＡＡ患者进行自体血液采集，血袋法分离制备ＰＲＰ用于皮损处注射治疗。原计划行３次ＰＲＰ治疗，但仅进行１次治疗，并且治疗效果显著。相比较目前报道较多的ＰＲＰ的制备方法［２３］，如单采法和试管法，结合该患者考虑，其单次使用ＰＲＰ的量少，使用血袋法制备的ＰＲＰ耗材成本低，且全程无菌，疗效提示血袋法制备ＰＲＰ安全有效。对于不适合无偿献血的患者，可以在制备ＰＲＰ后将剩余的红细胞及血浆进行血液回输，该方法对血液进行了最大程度地回收和利用，且避免过度增加耗材使用及患者负担，可作为ＰＲＰ制备的方案之一。

 

参考文献略。

 

来源：罗开云,齐清,王慜,王淑君,栾建凤.血袋法制备富血小板血浆治疗斑秃1例[J].临床血液学杂志,2022,35(12):897-899.